آماده سازی گیرنده‌های پیوند سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی با استفاده از تیمارهای گرما یا سرما

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 دانش آموخته دکتری گروه علوم دامی، پژوهشکده کشاورزی و صنایع غذایی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران.

2 دانشیار، پژوهشکده کشاورزی، سازمان پژوهش های علمی وصنعتی ایران.

3 دانشیار، پژوهشکده کشاورزی و صنایع غذایی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران.

4 استاد، پژوهشکده کشاورزی و صنایع غذایی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران.

چکیده

اگر سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی، به بیضه بره‌هایی که فاقد این نوع از سلول‌ها می‌باشند پیوند شوند در بیضه آنها شروع به تولید اسپرم می‌نمایند. هدف از انجام این تحقیق آماده‌سازی بیضه بره-های گیرنده پیوند بود. برای این منظور از تیمارهای دمایی 35، 45، 55 و 65 درجه سانتی‌گراد و یا از تیمار یخ آب به مدت 20، 40 و 60 دقیقه در سه نوبت به فاصله دو روز استفاده شد.نتایج نشان داد در تیمار 45 درجه سانتی‌گراد وضعیت بیضه‌ها طبیعی بود اما تیمار 55 درجه سانتی‌گراد باعث ایجاد عفونت در لوله‌های اسپرم‌ساز شد و در دمای 65 درجه سانتی‌گراد تخریب کامل بیضه‌هاصورت گرفت. استفاده از تیمار‌های یخ آب تغییری در وضعیت ظاهری بیضه‌ها ایجاد نکرد. تشکیل کلونی پس از استخراج و کشت سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی در تیمار 45 درجه سانتی‌گراد و تیمارهای یخ آب بطور معنی داری در مقایسه با شاهد کاهش یافت(05/0>P). بیان ژن‌های Plzf، cmyc وgfrlبه عنوان نشانگرهای اختصاصی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی در تیمار 45 درجه سانتی‌گراد و تیمارهای یخ آب بطور معنی داری در مقایسه با شاهد کاهش یافت(05/0>P). بر این اساس برای کاهش تعداد سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی بیضه بره می‌توان از تیمار یخ آب و یا دمای 45 درجه سانتی‌گراد به مدت 20 دقیقه در سه نوبت به فاصله دو روز استفاده نمود.

کلیدواژه‌ها


Creemers, L.B., Meng, X., den Ouden, K., van Pelt, A.M.,Izadyar, F., Santoro, M.,Sariola, H. and de Rooij, D.G. (2002). Transplantation of germ cells from glial cell linederivedneurotrophic factor-overexpressing mice to host testes depleted of endogenous spermatogenesis by fractionated irradiation. Biology of Reproduction. 66:1579-1584.
Ganguli, N., Wadhwa, N.,Usmani, A.,Kunj, N.,Ganguli, N.,Sarkar, R.K.,Ghorai, S.M. andMajumdar, S.S. (2016). An efficient method for enerating a germ cell depleted animal model for studies related to spermatogonial stem cell transplantation. Stem Cell Research and Therapy.7:142.
Herrid, M., Olejnik, J., Jackson, M.,Suchowerska,N.,Stockwell, S., Davey, R., Hutton, K., Hope, S. and Hill, J.R. (2009). Irradiation enhances the efficiency of testicular germ cell transplantation in sheep. Biology of Reproduction. 81: 898–905.
Honaramooz, A., Behboodi, E.,Hausler, C.L.,Blash, S., Ayres, S., Azuma, C.,Echelard, Y. andDobrinski, I. (2005).  Depletion of endogenous germ cells in male pigs and goats in preparation for germ cell transplantation.Journal of Andrology. 26:698-705.
Izadyar, F., Den Ouden, K., Stout, T.A., Stout, J.,Coret, J.,Lankveld, D.P.,Spoormakers, T.J.,Colenbrander, B.,Oldenbroek, J.K.,van der Ploeg, K.D.,Woelders, H. andKal, H.B. (2003). Autologous and homologous transplantation of bovine spermatogonial stem cells.Reproduction. 126:765–774.
Ma, W., An, L., Wu, Z., Wang, X.,Guo, M., Miao, K., Ma, W.andTian, J. (2011). Efficient and safe recipient preparation for transplantation of mouse spermatogonial stem cells: pretreating testes with heat shock. Biology of Reproduction. 85: 670–677.
Mohamed, R.H., Karam, R.A. andHagrass, H.A. (2015).Anti-apoptotic effect of spermatogonial stem cells on doxorubicin-induced testicular toxicity in rats.Gene.561: 107–114.
Mulder, C.L., Catsburg, L.A.E.,Zheng, Y., de Winter-Korver, C.M., van Daalen, S.K.M., van Wely, M.,  Pals, S.,Repping, S. and van Pelt, A.M.M. (2018). Long-term health in recipients of transplanted in vitro propagatedspermatogonial stem cells. Human Reproduction. 33(1): 81–90.
Oatley, J.M., Tibary, A., de Avila, D.M., Wheaton, J.E., McLean, D.J. and Reeves, J.J. (2005).Changes in spermatogenesis and endocrine function in the ram testis due to irradiation and active immunization against luteinizing hormonereleasing hormone.Journal of Animal Science. 83:604–612.
Olejnik, J.,Suchowerska, N.,Herrid, M., Jackson, M.,Hinch, G. and Hill, J. (2018).Spermatogonia survival in young ram lambs following irradiation, busulfan or thermal treatment. Small Ruminant Research.166:22–27.
Olejnik, J., Suchowersk, N.,Herrida, M.,Jacksond, M.,Hinche, G. andHilla, J. (2018).Spermatogonia survival in young ram lambs following irradiation, Busulfan or thermal treatment. Small Ruminant Research. 166: 22–27.
Qin, Y., Liu, L., He, Y., Ma, W., Zhu, H., Liang, M.,Hao, H., Qin, T., Zhao, X. and Wang, D. (2015). Testicular injection of busulfan for recipient preparation in transplantation of spermatogonial stem cells in mice.Reproduction Fertility and Development. 28(12):1916-1925.
Qin, Y., Liu, L., He, Y., Wang, C., Liang, M., Chen, X.,Hao, H., Qin, T., Zhao, X. and Wang, D. (2016). Testicular busulfan injection in mice to prepare recipients for spermatogonial stem cell transplantation is safe and non-toxic. PLoS ONE. 11(2):1-15.
Rasouli, M.H., Zandi, M., Sadeghi, A.A, Emamjomeh-Kashan, N. (2020). Spermatogonial stem cell survival in ram lambs following busulfan treatment. Animal Reproduction.17:e20200001.
Rocha, D.R., Martins, J.A., van Tilburg, M.F., Oliveira, R.V., Moreno, F.B.,Monteiro-Moreira, A.C., Moreira, R.A., Araujo, A.A. and Moura, A.A. (2015). Effect of increased testicular temperature on seminal plasma proteome of the ram.Theriogenology. 84:1291-1305.
Rockett, J.C., Mapp, F.L.,Garges, J.B.,Luft, J.C., Mori, C. and Dix, D.J. (2001).Effects of hyperthermia on spermatogenesis, apoptosis, gene expression, and fertility in adult male mice.Biology of Reproduction. 65:229–239.
Rodriguez-Sosa, J.R., Dobson, H. and Hahnel, A. (2006).Isolation and transplantation of spermatogonia in sheep.Theriogenology. 66: 2091–2103.
Setchell, B.P. (1998). The parkes lecture. Heat and the testis.Journal of Reproductionand Fertility. 114:179–194.
Thanh, T.N., Van, P.D., Cong, T.D., Minh, T.L., Vu, Q.H.N. (2020). Assessment of testis histopathological changes and spermatogenesis in male mice exposed to chronic scrotal heat stress. J Anim Behav Biometeorol.8:174-180.
van Pelt, A.M.M., Morena, A.R., van Dissel-Emiliani, F.M.F.,Boitani, C.,Gaemers, I.C., de Rooij, D.G. andStefanini, M. (1996). Isolation of the synchronized A spermatogonia from adult vitamin A- deficient rat testes.Biology of Reproduction. 55:439-44.