تأثیر افزودن آنتی‌اکسیدان هدفمند 4،2-دی‌نیتروفنل بر بهبود فرا سنجه‌های کمی و کیفی اسپرم قوچ قزل طی فرایند انجماد-یخ گشایی در فصل غیرتولیدمثلی

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز

2 گروه علوم دام و طیور، پردیس ابوریحان، دانشگاه تهران

چکیده

میتوکندری بعنوان موتور تأمین‌کننده انرژی اسپرم دارای خواص منحصربفردی از جمله عدم نفوذپذیری آنتی‌اکسیدانت است، به همین خاطر غلظتROS موجود در این اندامک 5 الی 10 برابر غشاء پلاسمایی است. بنابر این محققین آنتی‌اکسیدانی طراحی کردند که توانایی عبور از غشاء میتوکندری را داشته باشد و بتواند ROS موجود در این اندامک را مهار نماید تا آسیب‌های اکسیداتیو وارده بر این اندامک را به حداقل برساند. آنتی‌اکسیدان هدفمند 4،2-دی‌نیتروفنل توانایی عبور از غشاء میتوکندری را دارا است. هدف پژوهش حاضر افزودن سطوح مختلف آنتی‌اکسیدان هدفمند به مایع منی جهت پاک‌سازی میتوکندری از گونه‌های فعال اکسیژن، کاهش آسیب‌های ناشی اکسیداسیون جهت بهبود تحرک اسپرم و زنده‌مانی اسپرم است. در این مطالعه از 8 رأس قوچ نژاد قزل با سن 2 سال، بوسیله واژن مصنوعی در اوایل فصل بهار اسپرم‌گیری شد، پس از ارزیابی اولیه نمونه‌ها در صورت نرمال بودن باهم مخلوط شده و پس از رقیق‌سازی سطوح0، 25/0، 5/0، 75/0 و 1 نانومولار 4،2-دی‌نیتروفنل به نمونه‌ها افزوده‌شد. پس از 2 ساعت سردسازی، نمونه‌ها منجمد شدند. پس از یک ماه نمونه‌ها ذوب شده و از نظر پارامتر‌های حرکتی، زنده‌مانی، سلامت غشاء، اسپرم ناسالم و میزان لیپید‌پراکسیداسیون اندازه‌گیری شدند. بر اساس نتایج بدست‌آمده افزودن 5/0نانومولار سبب افزایش معنی‌دار (05/0 >P) پارامترهای حرکتی و کاهش اسپرم‌های ناسالم و همچنین سطوح 5/0و75/0 نانومولار سبب افزایش معنی‌دار زنده‌مانی و افزایش معنی‌دار سلامت غشا و کاهش میزان لیپید پراکسیداسیون شد (05/0 >P).

کلیدواژه‌ها


پویا، م .، خدایی مطلق، م .، خلت آبادی فراهانی، ا.،  و میرزایی، م. (1396). تاثیر سطوح متفاوت سولفات روی به رقیق کننده منی بر کیفیت اسپرم قوچ نژادفراهانی پس از انجماد-ذوب. مجله سلول و بافت شماره: 8 (4)، ص374-386.
شهباززاده، ر.، دقیق­کیا، ح .، مقدم، غ.،  دهقان، غ.، حسینخانی، ع.،  و اشرفی، ا. (2015). تاثیر سطوح مختلف عصاره الکلی مرزه سهندی بر کیفیت اسپرم منجمد-یخ‌گشایی شده گاو هلشتاین. پژوهش های علوم دامی (دانش کشاورزی). شماره 25 (1)، ص ص 13-24.
دقیق‌کیا، ح .، جعفری، س .،مقدم؛ غ.، ابراهیمی، م.، و  نجفی، ا. (1397). تأثیر مکمل سازی رقیق‌کننده با سطوح مختلف ال-کارنیتین بر کیفیت منی قوچ قزل بعد از فرآیند انجماد یخ گشایی در خارج فصل تولیدمثلی. پژوهشهای تولیدات دامی. شماره 9 (19)، ص ص 48-53.
محمدی، ن. و دقیق­کیا، ح. (1398). مهار تولید ROS از طریق افزودن آنتی اکسیدان هدفمند 2-4-دی‌نیتروفنول و تاثیر آن بر عملکرد اسپرم منجمد-یخ‌گشایی خروس. علوم دامی (پژوهش و سازندگی). شماره 32 (123)، ص ص 3-16
مهدی پور، م.، دقیق­کیا، ح. (1398). بهبود کیفیت اسپرم خروس با افزودن غلظت­های مختلف نارینژنین بعد از فرآیند انجماد-یخ­گشایی. پژوهش­های تولیدات دامی. شماره ۱۰ (۲۵)، ص‌ص۶۱-۶۸
Bucak, M.N., Ateşşahin, A. and Yüce, A. (2008). Effect of anti-oxidants and oxidative stress parameters on ram semen after the freeze–thawing process. Small Ruminant Research,  75 (2-3): 128-134.
Chatdarong, K., Chaivechakarn, A., Thuwanut, P. and Ponglowhapan, S. (2012). Effects of cold storage prior to freezing on superoxide dismutase, glutathione peroxidase activities, level of total reactive oxygen species and sperm quality in dogs. Reproduction in Domestic Animals,  47: 274-277.
Dong, Q., Tollner, T.L., Rodenburg, S.E., Hill, D.L. and VandeVoort, C.A. (2010). Antioxidants, Oxyrase, and mitochondrial uncoupler 2, 4-dinitrophenol improved postthaw survival of rhesus monkey sperm from ejaculates with low cryosurvival. Fertility and sterility.  94 (6): 2359-2361.
Evans, G. and Maxwell, W. (1987). Frozen storage of semen, Salamon's artificial insemination of sheep and goats, Butterworths Wellington,. 122-141.
Esterbauer, H., Cheeseman, K.H., (1990). Determination of aldehydic lipid peroxidation products: malonaldehyde and 4-hydroxynonenal, Methods in enzymology, Elsevier, 186;. 407-421
Fang, L., Bai, C., Chen, Y., Dai, J., Xiang, Y., Ji, X., Huang, C. et al. (2014). Inhibition of ROS production through mitochondria-targeted antioxidant and mitochondrial uncoupling increases post-thaw sperm viability in yellow catfish. Cryobiology.  69 (3): 386-393.
Ford, W. (2006). Glycolysis and sperm motility: does a spoonful of sugar help the flagellum go round? Human Reproduction Update.  12 (3): 269-274.
Grossfeld, R., Sieg, B., Struckmann, C., Frenzel, A., Maxwell, W., Rath, D. (2008). New aspects of boar semen freezing strategies. Theriogenology.  70 (8): 1225-1233.Harper, J., Dickinson, K. and Brand, M. (2001). Mitochondrial uncoupling as a target for drug development for the treatment of obesity. Obesity Reviews.  2 (4): 255-265.
Hernández, M., Roca, J., Gil, M.A., Vázquez, J.M., Martínez, E.A. (2007). Adjustments on the cryopreservation conditions reduce the incidence of boar ejaculates with poor sperm freezability. Theriogenology.  67 (9): 1436-1445.
Jin, H., Kanthasamy, A., Ghosh, A., Anantharam, V., Kalyanaraman, B. and Kanthasamy, A.G. (2014). Mitochondria-targeted antioxidants for treatment of Parkinson's disease: preclinical and clinical outcomes. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease.  1842 (8): 1282-1294.
Jovanovic, O., Gille, L., Vazdar, M. and Pohl, E.E. (2019). Membrane Lipids Alter Uncoupling Effect of 2, 4 Dinitrophenol. Biophysical Journal.  116 (3): 511a.
Karger, S., Geiser, B., Grau, M., Heuwieser, W. and Arlt, S. (2017). Progressive motility of frozen–thawed canine semen is highest five minutes after thawing. Reproduction in Domestic Animals.  52 (2): 350-352.
Korshunov, S.S., Skulachev, V.P. and Starkov, A.A. (1997). High protonic potential actuates a mechanism of production of reactive oxygen species in mitochondria. FEBS letters.  416 (1): 15-18.
Lecewicz, M., Strzeżek, R., Majewska, A.M., Purpurowicz, P.S. and Kordan, W. (2019). The effect of different concentrations of caffeine, pentoxifylline and 2’-deoxyadenosine on the biological properties of frozen-thawed canine semen. Annals of Animal Science.  19 (3): 733-746.
Macháty, Z., Thompson, J.G., Abeydeera, L.R., Day, B.N. and Prather, R.S. (2001). Inhibitors of mitochondrial ATP production at the time of compaction improve development of in vitro produced porcine embryos. Molecular reproduction and development.  58 (1): 39-44.
Najafi, A., Kia, H.D., Mohammadi, H., Najafi, M.H., Zanganeh, Z., Sharafi, M., Martinez-Pastor, F. et al. (2014). Different concentrations of cysteamine and ergothioneine improve microscopic and oxidative parameters in ram semen frozen with a soybean lecithin extender. Cryobiology.  69 (1): 68-73.
Pribenszky, C., Vajta, G., Molnar, M., Du, Y., Lin, L., Bolund, L. and Yovich, J. (2010). Stress for stress tolerance? A fundamentally new approach in mammalian embryology. Biology of reproduction.  83 (5): 690-697.
Roca, J., Rodríguez, M.J., Gil, M.A., Carvajal, G., Garcia, E.M., Cuello, C., Vazquez, J.M. and Martinez, E.A. (2005). Survival and in vitro fertility of boar spermatozoa frozen in the presence of superoxide dismutase and/or catalase. Journal of andrology.  26 (1): 15-24.
Rousset, S., Alves-Guerra, M.-C., Mozo, J., Miroux, B., Cassard-Doulcier, A.-M., Bouillaud, F. and Ricquier, D. (2004). The biology of mitochondrial uncoupling proteins. Diabetes.  53 (suppl 1): S130-S135.
Rui, B.R., Angrimani, D.S., Losano, J.D.A., de Cássia Bicudo, L., Nichi, M. and Pereira, R.J. (2017). Validation of simple and cost-effective stains to assess acrosomal status, DNA damage and mitochondrial activity in rooster spermatozoa. Animal reproduction science.  187 133-140.
Revell, S.G. and Mrode, RA. (1994) An osmotic resistance test for bovine semen. Animal Reproduction Science 36: 77-86.
Sanocka, D. and Kurpisz, M. (2004). Reactive oxygen species and sperm cells. Reproductive Biology and Endocrinology.  2 (1): 12.18
Silva, E.F., Junior, A.S.V., Cardoso, T.F., Stefanello, F.M., Kalb, A.C., Martínez, P.E. and Corcini, C.D. (2016). Reproductive toxicology of 2, 4 dinitrophenol in boar sperm. Toxicology in Vitro.  35 31-35.
Skulachev, V.P., Anisimov, V.N., Antonenko, Y.N., Bakeeva, L.E., Chernyak, B.V., Erichev, V.P., Filenko, O.F., Kalinina, N.I., Kapelko, V.I. and Kolosova, N.G. (2009). An attempt to prevent senescence: a mitochondrial approach. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Bioenergetics.  1787 (5): 437-461.
Wang, G., Kang, N., Gong, H., Luo, Y., Bai, C., Chen, Y.,  et al. (2015). Upregulation of uncoupling protein Ucp2 through acute cold exposure increases post-thaw sperm quality in zebrafish. Cryobiology.  71 (3): 464-471.
Zhang, J., Bao, X., Zhang, M., Zhu, Z., Zhou, L., Chen, Q., Zhang, Q. and Ma, B. (2019). MitoQ ameliorates testis injury from oxidative attack by repairing mitochondria and promoting the Keap1-Nrf2 pathway. Toxicology and applied pharmacology.  370 78-92.